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पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) विश्लेषण एक प्रयोगशाला तकनीक है। पीसीआर परीक्षण का उद्देश्य एक नमूने में डीएनए की छोटी मात्रा का पता लगाना है, जिसे एक प्रक्रिया के रूप में जाना जाता है विस्तारण। पीसीआर प्रवर्धन के दौरान, रुचि के डीएनए को बार-बार कॉपी किया जाता है जब तक कि विश्लेषण और पता लगाने के लिए पर्याप्त न हो। उदाहरण के लिए, पीसीआर का उपयोग उन जीवों से डीएनए की छोटी मात्रा की पहचान करने के लिए किया जा सकता है जो गोनोरिया या क्लैमाइडिया का कारण बनते हैं जो मूत्र के नमूने में मौजूद होते हैं।पीसीआर कैसे काम करता है?
PCR का पहला चरण बनाना है प्राइमरों। ये डीएनए के संक्षिप्त क्रम हैं जो डीएनए नमूने के उन छोरों से मेल खाते हैं जिनका आप पता लगाने की कोशिश कर रहे हैं। वे डीएनए के एक विशेष टुकड़े को खोजने, प्रवर्धित करने और उसका पता लगाने की चाल हैं। एक रोगज़नक़ की पहचान करने के लिए डीएनए के उस टुकड़े का उपयोग किया जा सकता है। इसका उपयोग एंटीबायोटिक प्रतिरोध के लिए जीन का पता लगाने जैसे काम करने के लिए भी किया जा सकता है।
एक बार आपके प्राइमर होने के बाद, पीसीआर में अगला कदम सैंपल को गर्म करना होता है ताकि डबल स्ट्रैंडेड डीएनए दो सिंगल स्ट्रैंड में अलग हो जाए-इसे कहा जाता है विकृतीकरण। फिर प्राइमरनमूना डीएनए के साथ संयुक्त हैं। इसके बाद, एक डी.एन.ए. पोलीमर्स प्राइमर स्थान पर डीएनए प्रतिकृति शुरू करने के लिए उपयोग किया जाता है। अंत में, स्ट्रैंड को एक बार फिर से अलग करने के लिए डीएनए को गर्म किया जाता है। उसी के साथ, पूरी पीसीआर प्रक्रिया फिर से शुरू होती है।
नमूने में मौजूद ब्याज के डीएनए खंड की मात्रा प्रत्येक पीसीआर चक्र के साथ तेजी से बढ़ जाती है। पहले चक्र में, एक प्रति दो हो जाती है। फिर दो प्रतियां चार हो जाती हैं, फिर आठ हो जाते हैं, आदि इस घातीय वृद्धि का मतलब है कि, आमतौर पर, केवल 20 से 40 चक्रों को यह निर्धारित करने की आवश्यकता है कि क्या डीएनए मौजूद है। (यदि डीएनए मौजूद है, तो विश्लेषण के लिए पर्याप्त नमूना प्रदान करने के लिए 20-40 चक्र भी पर्याप्त हैं)।
एक पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के सभी चरण-डीएनए को अलग करना, प्राइमर को लागू करना, और डीएनए को अलग-अलग तापमान पर बढ़ाना। इसका मतलब है कि प्रारंभिक मिश्रण को एक साथ रखा जाने के बाद, चरणों को एक प्रक्रिया के माध्यम से नियंत्रित किया जा सकता है, जिसे कहा जाता है thermocycling। थर्मोसायकलिंग का अर्थ है कि प्रत्येक चरण के लिए तापमान को लंबे समय तक आवश्यक स्तर पर रखा जाता है। इस प्रकार, पीसीआर लक्ष्य डीएनए की मात्रा को बढ़ाने का एक कुशल तरीका है। वास्तव में, यह मानव हस्तक्षेप के लिए बहुत कम आवश्यकता वाली एकल टेस्ट ट्यूब में पूरा किया जा सकता है।
पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन ने जैविक तकनीक में एक क्रांति का प्रतिनिधित्व किया जब यह पहली बार 1980 के दशक में विकसित हुआ था। पीसीआर के निर्माता, कैरी मुलिस ने 1993 में अपने काम के लिए रसायन विज्ञान में नोबेल पुरस्कार जीता।
पीसीआर एसटीडी परीक्षण के लिए प्रासंगिक क्यों है
पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन, और संबंधित तकनीक जैसे ligase श्रृंखला प्रतिक्रिया, एसटीडी परीक्षण के लिए बढ़ते महत्व के साबित हो रहे हैं। ऐसा इसलिए है क्योंकि ये तकनीक सीधे नमूनों में वायरल डीएनए या आरएनए की थोड़ी मात्रा की पहचान कर सकती हैं। एक रोगज़नक़ के आनुवंशिक कोड की पहचान करने के लिए रोगज़नक़ को जीवित होने के विपरीत-जीवाणु संस्कृति या वायरल संस्कृति की आवश्यकता नहीं होती है। लोगों को एक डिटेक्टिव एंटीबॉडी रिएक्शन विकसित करने के लिए (एलिसा द्वारा जिस तरह से संक्रमण का पता लगाया जाता है।) इसका संक्रमण काफी समय पहले हुआ है, इसके लिए संक्रमण की आवश्यकता नहीं होती है। इसका मतलब है कि पीसीआर तकनीक कभी-कभी अन्य परीक्षणों की तुलना में बीमारियों का पता लगा सकती है। इससे भी बेहतर, एसटीडी का पता लगाया जा सकता है, क्योंकि नमूनों को जीवित रखने या सही समय पर परीक्षण के बारे में चिंतित होने की आवश्यकता नहीं है।
बेस्ट एट-होम एसटीडी टेस्ट