एचआईवी आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण कैसे काम करता है?

विषय

• एक जीनोटाइप और एक फेनोटाइप क्या है?
• एचआईवी जीनोटाइपिंग के बारे में बताते हुए
• एचआईवी Phenoytyping समझाते हुए
• जब एक आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण किया जाता है?

यहां तक ​​कि चिकित्सा के लिए इष्टतम पालन वाले लोगों के लिए, वायरस के प्राकृतिक म्यूटेशन के कारण एचआईवी दवा प्रतिरोध की कुछ डिग्री समय के साथ विकसित होने की उम्मीद है। अन्य मामलों में, प्रतिरोध तेजी से विकसित हो सकता है जब उप-गोद के पालन के लिए प्रतिरोधी एचआईवी आबादी को पनपने की अनुमति मिलती है, जिससे अंततः उपचार विफलता होती है।

जब उपचार विफलता होती है, तो वैकल्पिक वायरस संयोजनों को प्रतिरोधी वायरस की इस नई आबादी को दबाने के लिए चुना जाना चाहिए। आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण एक व्यक्ति के "वायरल पूल" में प्रतिरोधी म्यूटेशन के प्रकारों की पहचान करके इसे सुविधाजनक बनाने में मदद करता है, जबकि यह पता लगाने के लिए कि उन वायरस संभावित एंटीरेट्रोवाइरल एजेंटों के लिए कितने संवेदनशील हैं।

एचआईवी में आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण के लिए दो प्राथमिक उपकरणों का उपयोग किया जाता है: द एचआईवी जीनोटाइपिक परख और यह एचआईवी फेनोटाइपिक परख.

एक जीनोटाइप और एक फेनोटाइप क्या है?

परिभाषा के अनुसार, एक जीनोटाइप केवल एक जीव का आनुवंशिक श्रृंगार है, जबकि एक फेनोटाइप उस जीव के अवलोकन योग्य लक्षण या लक्षण हैं।

एक सेल के आनुवंशिक कोडिंग, या डीएनए के भीतर निहित निर्देशों की पहचान करके जीनोटाइपिक assays (या जीनोटाइपिंग) फ़ंक्शन। फेनोटाइपिक असेस (या फेनोटाइपिंग) विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों के प्रभाव में उन निर्देशों की अभिव्यक्ति की पुष्टि करता है।

जबकि जीनोटाइप और फेनोटाइप के बीच का संबंध पूर्ण नहीं है, जीनोटाइपिंग अक्सर फेनोटाइप का अनुमान लगाया जा सकता है, विशेष रूप से जब आनुवंशिक कोड में परिवर्तन लक्षण या विशेषताओं में अपेक्षित परिवर्तन को प्रभावित करता है-जैसे कि दवा प्रतिरोध विकसित करने के मामले में।

दूसरी ओर, फेनोटाइपिंग, "यहाँ-और-अब" की पुष्टि करता है। इसका उद्देश्य पर्यावरण के दबाव में विशिष्ट परिवर्तनों के लिए किसी जीव की प्रतिक्रिया का आकलन करना है, जैसे कि जब एचआईवी अलग-अलग दवाओं और / या दवा की सांद्रता के संपर्क में आता है।

एचआईवी जीनोटाइपिंग के बारे में बताते हुए

एचआईवी जीनोटाइपिंग आमतौर पर प्रतिरोध परीक्षण के लिए इस्तेमाल की जाने वाली सबसे आम तकनीक है। परख का लक्ष्य में विशिष्ट आनुवंशिक उत्परिवर्तन का पता लगाना है गैग-पोल वायरस का क्षेत्र ' जीनोम (या आनुवंशिक कोड)। यह वह क्षेत्र है जहां रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, प्रोटीज और एंजाइम को एकीकृत करता है-अधिकांश एंटीरेट्रोवायरल दवाओं के लक्ष्य डीएनए श्रृंखला पर एन्कोडेड हैं।

पहले पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) तकनीक का उपयोग करके एचआईवी जीनोम को प्रवर्धित करके, लैब तकनीशियन विभिन्न म्यूटेशन डिटेक्शन तकनीकों का उपयोग करके वायरस के आनुवंशिकी को अनुक्रमित (या "मैप") कर सकते हैं।

Theses म्यूटेशन (या उत्परिवर्तन संचय) की व्याख्या ऐसे तकनीशियनों द्वारा की जाती है, जो पहचाने गए उत्परिवर्तन और वायरस के बीच विभिन्न एंटीरेट्रोवाइरल दवाओं के प्रति संवेदनशीलता की संभावना का विश्लेषण करते हैं। ऑनलाइन डेटाबेस एक प्रोटोटाइप "जंगली-प्रकार" वायरस (यानी, एचआईवी जिसमें कोई प्रतिरोधी उत्परिवर्तन नहीं होता है) के परीक्षण क्रम की तुलना करके सहायता कर सकते हैं।

इन परीक्षणों की व्याख्या का उपयोग दवा की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए किया जाता है, अधिक से अधिक संख्या में म्यूटेशन के बाद दवा प्रतिरोध के उच्च स्तर का उल्लेख किया जाता है।

एचआईवी Phenoytyping समझाते हुए

एचआईवी फेनोटाइपिंग एक दवा की उपस्थिति में व्यक्ति के एचआईवी के विकास का आकलन करता है, फिर उसी दवा में एक नियंत्रण, जंगली प्रकार के वायरस के विकास की तुलना करता है।

जीनोटाइपिक assays के साथ, फेनोटाइपिक परीक्षण एचआईवी जीनोम के गैग-पोल क्षेत्र को बढ़ाते हैं। आनुवांशिक कोड का यह खंड एक जंगली प्रकार के क्लोन पर "ग्राफ्टेड" का उपयोग करके किया जाता है पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी। परिणामस्वरूप पुनः संयोजक वायरस का उपयोग इन विट्रो (प्रयोगशाला में) में स्तनधारी कोशिकाओं को संक्रमित करने के लिए किया जाता है।

वायरल नमूना 50% और 90% वायरल दमन प्राप्त होने तक विभिन्न एंटीरेट्रोवायरल दवाओं की बढ़ती सांद्रता के संपर्क में है। सांद्रता नियंत्रण, जंगली प्रकार के नमूने के परिणामों की तुलना में है।

रिश्तेदार "गुना" परिवर्तन मूल्य सीमा प्रदान करते हैं जिसके द्वारा दवा संवेदनशीलता निर्धारित की जाती है। एक चार गुना परिवर्तन का सीधा मतलब है कि जंगली प्रकार की तुलना में वायरल दमन को प्राप्त करने के लिए चार गुना दवा की आवश्यकता थी। गुना मूल्य जितना अधिक होगा, कम अतिसंवेदनशील वायरस एक विशिष्ट दवा के लिए है।

इन मूल्यों को फिर निचले-नैदानिक ​​और ऊपरी-नैदानिक ​​श्रेणियों के भीतर रखा जाता है, ऊपरी मूल्यों के साथ दवा प्रतिरोध के उच्च स्तर का संदर्भ दिया जाता है।

जब एक आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण किया जाता है?

अमेरिकी में, आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण पारंपरिक रूप से उपचार भोले रोगियों पर किया जाता है ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि उनके पास कोई "अधिग्रहित" दवा प्रतिरोध है। अमेरिका में अध्ययन से पता चलता है कि संक्रमित वायरस के 6% से 16% के बीच कम से कम एक एंटीरेट्रोवाइरल दवा प्रतिरोधी होगी, जबकि लगभग 5% दवा के एक से अधिक वर्ग के लिए प्रतिरोधी होगी।

आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण का उपयोग तब भी किया जाता है जब चिकित्सा पर व्यक्तियों में दवा प्रतिरोध का संदेह होता है। परीक्षण तब किया जाता है जब रोगी या तो विफल रहता है या उपचार बंद होने के चार सप्ताह के भीतर अगर वायरल लोड 500 प्रतियों / एमएल से अधिक है। आम तौर पर इन उदाहरणों में जीनोटाइपिक परीक्षण को प्राथमिकता दी जाती है क्योंकि उनकी लागत कम होती है, तेजी से बदलाव का समय होता है, और जंगली प्रकार और प्रतिरोधी वायरस के मिश्रण का पता लगाने के लिए अधिक संवेदनशीलता प्रदान करते हैं।

फेनोटाइपिक और जीनोटाइपिक परीक्षण का संयोजन आम तौर पर जटिल, बहु-दवा प्रतिरोध वाले व्यक्तियों के लिए पसंद किया जाता है, विशेष रूप से प्रोटीज अवरोधकों के संपर्क में आने वाले लोगों के लिए।